测DNA含量绘标准曲线时，怎么算DNA的浓度

测DNA含量绘标准曲线时，算DNA的浓度的方法：

1. 先把标准品的浓度和每个标准品的吸光度用Excel生成标准曲线,同时得到公式。

2. 测量每个样本的吸光度。

3. 把吸光度代入公式,计算出对应的浓度.如果样本有稀释,还要乘以稀释倍数。

DNA及RNA含量测定方法：

1. 取5ulDNA样品或4ulRNA样品加水到lml。 

2. 用lml水做空白。

3. 把样品杯放在分光光度计比色槽上。 

4. 每ul中DNA或RNA浓度(ug)将是OD值的10倍，例如稀释后样品在260nm处OD值为0.2，则原DNA或RNA样品浓度为2ug／ul。 

5. 如果想要检测样品的纯度，那么还要再测一次280nm处OD值，计算二者的比率，若比率接近2，则说明样品中核酸比较纯。若比率小于1.6，则说明蛋白或其它吸收此波长的杂质在其中，建议再用酚／氯仿抽提继以乙醇沉淀以除去杂质。 

6. 如果想检测样品中是否残存酚等有机杂质，那么还要测定一次230nm处OD值。 

之前做实验，朋友介绍了一款AAT Bioquest 的DNA浓度计算器，用着很方便 ，推荐给你

DNA浓度计算器 

介绍：

通过分子量、消光系数、和λmax带入Beer-Lambert定律的派生形式，可以确定溶液中DNA的浓度。物质的入max是其经历最强吸光度时的波长。对于DNA，这个波长是260nm。

Nucleotide:核苷酸。可以选三种，dsDNA（单链DNA）、ssDNA（双链DNA）、自定义

Dilution factor (optional)：稀释倍数

Pathlength：路径长度

注意：

1. DNA应该溶解在溶液中，DNA沉淀将导致浓度计算不准确。

2. 吸光度读数不应超过仪器的最大检测限。这可以通过吸收光谱中的平台来确定。如果吸收光谱平稳，稀释样品可以再尝试一次。

3. 该计算器设定仪器的光程长度为1cm。用于分光光度计的标准比色皿（通常为1cm）。如果使用不同路径长度，则应在数据输入过程中更正数值。

    

   使用说明：

4. 选择核苷酸或选择自定义序列进入核苷酸序列

5. 在λmax处输入吸光度。对于典型的核苷酸，λmax是260nm，但这个值可能会根据核苷酸而改变。请使用分光光度计读数所示的最大吸光度（即最高峰）

6. 如果用稀释样品获得吸光度，请输入稀释因子以确定原始样品浓度

7. 如果路径长度与1cm不同，请将更正后的数值输入λ光程文本框

8. 按“计算”显示浓度

    

   https://www.aatbio.com/tools/calculate-DNA

   DNA浓度计算器

    

    

    

   介绍：

   通过分子量、消光系数、和λmax带入Beer-Lambert定律的派生形式，可以确定溶液中DNA的浓度。物质的入max是其经历最强吸光度时的波长。对于DNA，这个波长是260nm。

    

   Nucleotide:核苷酸。可以选三种，dsDNA（单链DNA）、ssDNA（双链DNA）、自定义

   Dilution factor (optional)：稀释倍数

   Pathlength：路径长度

    

    

    

   注意：

   1. DNA应该溶解在溶液中，DNA沉淀将导致浓度计算不准确。

   2. 吸光度读数不应超过仪器的最大检测限。这可以通过吸收光谱中的平台来确定。如果吸收光谱平稳，稀释样品可以再尝试一次。

   3. 该计算器设定仪器的光程长度为1cm。用于分光光度计的标准比色皿（通常为1cm）。如果使用不同路径长度，则应在数据输入过程中更正数值。

       

      使用说明：

   4. 选择核苷酸或选择自定义序列进入核苷酸序列

   5. 在λmax处输入吸光度。对于典型的核苷酸，λmax是260nm，但这个值可能会根据核苷酸而改变。请使用分光光度计读数所示的最大吸光度（即最高峰）

   6. 如果用稀释样品获得吸光度，请输入稀释因子以确定原始样品浓度

   7. 如果路径长度与1cm不同，请将更正后的数值输入λ光程文本框

   8. 按“计算”显示浓度